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菌種凍干機保存菌種的步驟主要包括哪些

更新時間:2022-05-12點擊次數(shù):1203
 
  菌種凍干機是一款專門針對菌種保存而設計的凍干機。利用安剖管架預凍好的樣品直接轉移擺放到凍干倉隔板上即可,容量大,操作簡便。316L醫(yī)用級不銹鋼材質方形凍干倉,隔熱保溫效果好,真空性能好,有效避免樣品因干燥過程中升溫過快而發(fā)生樣品外形塌陷,活性降低等問題。是研究菌種保存客戶的理想選擇。
 

 

  冷凍干燥是將菌體懸浮液冷凍到冰點以下,從而轉變?yōu)楣腆w結晶態(tài),然后在低溫低壓(真空)下使固體升華而脫水的干燥方法。一般干燥處理過程會破壞微生物的細胞膜,引起細胞的大量死亡,因此需要添加保護劑,能夠使菌液密度均一,減少活菌在凍干過程中的機械效應和溶質效應帶來的死亡。因此,在凍干前加入的保護劑配方就成為了至關重要的決定性因素,它既會影響到儲存期細胞的活性以及穩(wěn)定性,也會影響到復水時細胞存活率。
 
  菌種凍干機保存菌種的步驟主要包括:
 
  1、微生物培養(yǎng),培養(yǎng)獲得健壯的菌種擴培液體。培養(yǎng)時根據(jù)菌種選擇不同的培養(yǎng)基。培養(yǎng)到對數(shù)期獲得大量健壯的菌種,保證菌體濃度,一般達到109的濃度.
 
  2、離心收集菌體。通過離心法從液體培養(yǎng)基中獲得菌體。如果是固體培養(yǎng)基可以直接收集菌落,用保護劑溶解混勻。
 
  3、將菌體、脫脂奶粉、海藻糖、蔗糖等保護劑在無菌水中混勻得到含有保護劑的菌體混懸液。
 
  4、分裝。將菌體混懸液在無菌環(huán)境中分裝到無菌容器中,可以是安瓿瓶、西林瓶、EP、培養(yǎng)皿等。
 
  5、預凍,預凍是非常關鍵的。預凍不好,菌體會死亡。要快速預凍,防止產(chǎn)生大冰晶造成細胞死亡。預凍要凍結實,保證預凍充分。
 
  6、將預凍好的菌體,放入真空冷凍干燥設備中進行凍干。如果是設備帶預凍功能,也可以直接在凍干機上進行預凍。真空冷凍干燥時間和凍干曲線的設計要根據(jù)菌種的不同和菌體混懸液的濃度等進行設計。凍干好后真空密封保存。

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